close
Vážení uživatelé,
16. 8. 2020 budou služby Blog.cz a Galerie.cz ukončeny.
Děkujeme vám za společně strávené roky!
Zjistit více
 
Na všechny fotografie z galerie a fotogalerie jsou uplatněna autorská práva. Bez mého svolení nekopirovat!!!

Klinická biochemie-Enzymy

7. září 2008 v 15:35 | Sharka |  Maturita
ENZYMY
Opakování z biochemie
- denaturace bílkovin-při 60 stupních C
-AC, substrát,…opakování z biochemie
-musíme dodržovat teplotu
-závisí- na optimální teplotě-37stupňů Celsia
-pro vyšetření je lepší teplota pokojová
- na pH-enzymy nemusí být stabilní ve zkumavce
-Oxidoreduktázy-substrát dodává, katalyzace oxid.reduk.pochodů
-Transferázy- přenáší malé skupiny(zbytek glukózy,..)
-Hydrolázy- štěpení molekul pomocí vody( štěpení peptidové vazby, štěpení lipidů,..)
-Lyázy- štěpí se jiným způsobem
-Izomerázy-přesun určitých skupin bez rozpadu molekuly=přenos skupiny v rámci molekuly
-Ligázy- katal. vznik energ.vazeb a přitom se některé molekuly rozpadají a vzniká ATP
Sekreční enzymy:
- b.ogánu a z buněk do krve kde účinkují
-některé ale účinkují jinde(Choliesterázy)
Buněčné enzymy:
- vznikající v buňce a účinkují vní(LDáza,ALT,AST)
-při poškození buněk, které je produkují-vzniká zvýšená hladina enzymů
-Enzymy najdeme ve všech buněčných strukturách, ale jinak vázaných
-enzymy v krvi mají vyšší hladinu při poškození buněk
-enzymy udává aktivita
-jednotka je jeden katal, zkr.kat
-většinou v mikrokatech
-1katal je množství enzymu, které přemění za standardních podmínek, za 1. sekundu, 1 mol substrátu.
-mezinárodní jednotka-U=16,67 nanokat
Podmínky aktivity enzymu:
-teplota(37stupňů Celsia)
-reakce při 25 stupních Celsia-nejvíc lineární, ale nejpomalejší
-reakce při 37 stupních Celsia-bude nejrychlejší a nejlineárnější
-termostat dáme na 37 stupňů(tolerance 0,1)
-pH
-každý enzym má jiné optimální pH
- pepsin-1,5-2,5
- pankreat.lipáza- 7-8 pH
Aktivátory a inhibitory:
-aktivátory-urychlují
-inhibitory-zpomaluji
Zymogen-neaktivní forma enzymu
-př: enzymy zažívacího traktu
AC bude obsazeno nízkomolekul.buňkami-doputují kam mají (př:střevo)-substrát vytěsní aby mohl působit a vznikne ATP
-Kompetitivní inhibice(soutěživá)-substrát vytěsní inhibitor
-Nekompetitivní inhibice- substrát vytěsní inhibitor z aktivního centra
-mezi nekompetitivní patří: alosterická-inhibitor se naváže jinam a nebude působit
- nebude působit když-AC je obsazené nebo nemůže vzniknout produkt
E+S=ES-dále vzniká P
Enzym+ substrát = enzymsubstrát a dále vzniká produkt
Izoenzymy-molekul.formy 1 enzymu, které mají stejnou substrátovou specifitu, ale liší se fyzikálně chemickými vlastnostmi
(Laktát dehydrogenáza- skládá se ze 2 podjednotek a v každé molekule jsou 4 jednotky)
HH HM MM
HH HH HH atd.
Podle toho jak jsou složené, tak jsou v jednotlivých orgánech
Kinetika reakcí-důležitá pro stanovení
-reakce nultého a prvního řádu
A,reakce nultého řádu
-reakce probíhá lineárně(nejsou tak časté)
-koncentrace substrátu je konstantní a mění se množství enzymu
B,reakce prvního řádu
-jsou časté
KM-Michaelisova konstanta
-popisuje maximální rychlost(Vmax)
-nás zajímá půlka maximální rychlosti
KM je číselně rovna koncentraci(c) substrátu, při niž rychlost reakce dosáhne poloviny maximální rychlosti Vmax
2
Př: Vmax = 1hodina
Vmax = 30minut
2 poté spustíme dobu a vyjde nám KM
-vybíráme substrát s nejnižší KM
A B C
-inhibitor neovlivní Vmax -inhibitor sníží Vmax -sníží se inhib.
-ovlivní KM(je nejvyšší) -nekompetitivní inhibice -sníží se i Vmax
-kompetitivní inhibice -nekompetitivní reakce
KM- má velký vliv při výběru substrátu pro stanovení
Inhibice enzym.reakcí v organismu
-buď v jiné části buňky
-probíhají rozkladné i nerozkladné reakce v jiné části buňky
-seřídí organismus podle potřeby či nežádoucí(hadí jedy,olovo)
-pro rozklad i tvorbu je jiný inhibitor
Typy regulace:
-změna molekuly enzymu
-sníží či zvýší množství molekul enzymu
--Kofaktory oxidoreduktáz-kys.glukonová, NAD
-Kofaktory transferáz-ATP
-Izomerázy nepotřebují kofaktory
Stanovení enzymů
a)stanovení aminotransferáz(transamináz)
-přenos amino skupiny z 1 aminokyseliny na ketokyselinu a opačně
-ALT,AST-specifické
ALT-alanin transferáza
AST-aspartatransferáza
-vyšetřují se společně
ALT
-cytoplazmatický enzym(v cytoplazmě a v mitochondriích)
-zvýšená aktivita v hepatocytech
-při mononukleóze, cirhóze jater, krátkodobá při požití většího množství alkoholu
AST
-vyskytuje se taky v játrech(35%)
-zbytek v srdečním a kosterním svalu
-zvýšená hladina -když je buňka narušena
- při infarktech
Transaminázy
-při jaterních onem., žloutenka, ..
Doplňkové vyšetření:
-při resuscitaci, otravě ox.uhelnatým,…
Poměr počítáme : AST : ALT
Výsledek pod 1- mírnější poškození
nad 1- větší poškození
Normální hodnoty ALT i AST - 0,67 mikrokat/ l(litr)
Metody na stanovení enzymu
1) END-POINT
-proběhne reakce za stand.podmínek
-reakce probíhá v určitý čas
-inhibitor-drastičtější
-v konečném čase reakci zastavíme a uděláme např:barvení
 

1 člověk ohodnotil tento článek.

Nový komentář

Přihlásit se
  Ještě nemáte vlastní web? Můžete si jej zdarma založit na Blog.cz.
 

Aktuální články

Reklama