Kreatinkináza (CK)
- enzym, kterým diagnostikujeme infarkt myokardu(při zvýšených hodnotách)
- enzym, který v organismu katalyzuje vratnou reakci fosforilace kreatinu
kreatin + ATP kreatinfosfát + ADP
ATP-adenosin trifosfat
ADP-adenosin difosfát
- probíhá oběma směry
- vratná reakce -10 x rychlejší → využívá se toho pro stanovení
- nachází se v srdečním svalu, kosterním svalu i v mozku
- má význam pro energetický metabolismus svalů
- skládá se ze dvou podjednotek - M (svalová)
- B (mozková)
MM → svalový
BB → mozkový (v krvi vzácně) izoenzymy
MB → srdeční
- MM, MB - i ve svalech kosterních i v srdci, ale v různém zastoupení
- kosterní sval MB 3%
MM 97%
- srdeční sval MB 42%
MM 58%
- když budeme stanovovat CK, stanovíme celkovou, kde budou oba izoenzymy → potom
stanovíme MB (když chceme určit infarkt myokardu)
- nízká hladina-vynechá se -jen při porušení hematoencefaltické bariéry
- zvýšená hladina celkové CK:
- infarkt myokardu
- při rozsáhlém poranění kosterního svalstva, krvácení do svalů
- u dlouhotrvající svalové námahy netrénovaných jedinců
- když budeme stanovovat izoenzymy → nejdříve stanovíme celkovou CK
- normální hodnoty: muži do 3,2 µkat /l
ženy do 2,4 µkat /l
CK - MB
- můžeme stanovit dvěma způsoby:
- do 0,4 µkat /l v aktivitě nebo do 6% celkové aktivity
- metody stanovení:
§ enzymatická metoda(slouží ke stanovení celkové aktivit)
- stanovuje se vzniklý ADP
- za použití NAD
- 10x rychlejší reakce-výhodnější
- ADP fosforilujeme zpět na ATP
- optický test
- rychlejší → výhodnější
- už se tolik nevyužívá → využívá se vylepšená - s jiným činidlem (kreatin fosfát)
- k NAD se přidá jiné činidlo(fosfoenlpyruvát), kreatin fosfát je výhodnější
- stanovení izoenzymu CK - MB:
§ elektroforéza
§ chromatografie
§ imunochemicky (imunoprecipitace)
- v séru směs CK - MB
- použijeme anti CK - M → zinhibujeme MM a polovinu MB → zbyde B → potom
stanovíme celkové CK → vynásobíme dvěma → pokud potom odečteme od celkové
→ známe hodnotu CK - MB
§ stanovení proteinu MB v CK
- bílkovina v izoenzymu
- výhoda - odpadá vliv inhibitorů
mutuo pujcka :-)