Zpracování krve na bakteriologické vyšetření - Hemokultura
Odběr krve na hemokulturu
- příprava kůže
Na kultivaci (tzv.hemokulturu) se krev odebírá ze žíly sterilní injekční jehlou do sterilní suché injekční stříkačky. Kůže v místě vpichu se nejprve očistí 70%alkoholem nebo mýdlovou vodou nebo 2% jódovou tinkturou nebo jiným velmi účinným dezinfekčním prostředkem.
- vlastní odběr
Celofán (hlin.kryt) z povrchu gumové zátky nádobky se odstraní ,zátka se rovněž potře opakovaně roztokem dezinfekčního prostředku. Do injekční stříkačky se odebere asi 5 ml krve (děti 2ml, kojenci 1ml),injekční jehla se rychle vymění a novou sterilní jehlou se propíchne gumová zátka a krev se vstříkne do nádobky s kultivační půdou. Celý postup je nutno provádět rychle, aby se krev ve stříkačce nesrazila a asepticky, aby nedošlo ke znečištění materiálu vzdušnýmy bakteriemi. Odběr krve na hemokulturu do otevřené zkumavky je naprosto nevhodný.
Krev na hemokultivaci se odebírá především při septických onemocněních (bakteriemie). Mikrobi nejsou v krvi trvale, vyplavují se opakovaně z ložiska infekce do krevního oběhu. Největší naděje na záchyt je před začátkem vzestupu teplot nebo hned na začátku teplotního vzestupu.Zásadně se krev odebírá před zahájením léčby antibiotiky.
Transport
Zároveň s hemokulturou odesíláme do laboratoře i dva vatové tampóny se stěry kůže před a po dezinfekci místa vpichu.
Zpracování v laboratoři
Vatové tampóny se zalomí do tekuté půdy (bujón) a druhý den vyočkují na krevní agar(1/4- masivně) a MC půdu(1/4).
Hemokultury se v laboratoři inkubují při 37o C. Při zjištění růstu mikroorganismů se vyočkují na krevní agar (1/2-KR) a přetahují stafylokokem aureem (H.inf), MC půdu (1/2),anaerobní půdy FO a SAB.Provede se přímá citlivost na ATB. Zároveň se provede mikroskopický preparát (Gram) .
Všechny manipulace s hemokulturou se provádějí v boxu s laminárním prouděním vzduchu, laborantka pracuje v gumových rukavicích, dbá všech zásad BOZP.
Manuální hemokultivace jsou postupně nahrazovány přístrojovými systémy různého typu. Jejich společným znakem je detekce růstu mikroorganizmů neinvazivním způsobem, tedy při uzavřené kultivační nádobce.
1.SIGNAL OXOID
V laboratoři se na kultivační nádobu nasadí "indikátor růstu". Inkubace probíhá při 37oC. Při růstu mikroorganismů dochází k tvorbě plynu, který tlačí na hladinu hemokultury a dochází k vytlačení tekutiny (krve, kult.půdy) přes jehlu do horní indikátorové nádobky. Tekutina v indikátorové nádobce signalizuje přítomnost mikroorganizmů v hemokultuře.
Druh mikroorganizmu zjistíme až podle preparátu a kultivace (viz výše).
Doba inkubace:
2.přístroj BacT/alert
Celý systém se skládá z lahviček obsahujících kultivační médium s vyšetřovaným materiálem a z automatického detekčního systému pro inkubaci 120 nebo 240 lahviček. Výrobce nabízí odběrové lahvičky v několika provedeních: aerobní, anaerobní, pediatrické, FAN aerobní a anaerobní. Dvě poslední obsahují inhibitor a neutralizátor ATB Ecosarb. Na dně lahviček je senzor tvorby CO2.
Systém užívá k detekci růstu mikroorganizmů tvorby CO2 v kultivačním médiu. Jsou-li ve vzorku přítomny mikroorganizmy, metabolizováním substrátu média se tvoří CO2, který mění barvu senzoru na dně lahvičky z tmavě zelené na žlutou. Lahvičky jsou každých 10 minut automaticky monitorovány a změny barvy senzoru se automaticky přes počítač signalizují.
Přítomnost mikroorganizmů je zjištěna již za několik hodin (5). Délka kultivace 7 dnů
Hodnocení:
Fyziologický nález: sterilní
Patologický nález:
Z pozitivní hemokultury jsou nejčastěji zachyceny stafylokoky (St. epidermidis i St. aureus), enterobakterie, streptokoky (sk.D,B), hemofily, pneumokoky, salmonely, pseudomonas, candida. Nález je třeba srovnat v nálezem ze stěru místa vpichu při odběru hemokultury.
уууууу tolik... nádhera..... :-D